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细说写作｜周乙华教授——如何撰写论文的“材料与方法”
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作者：特约专家——周乙华教授
医院主任医师、教授、博导。长期从事病毒性肝炎的临床、教学、研究和预防，曾在日本和美国学习、工作10年，年回国后着重研究围产感染。
正文第二部分——材料与方法
研究对象是什么、如何实施研究工作的具体操作、使用了哪些重要材料、如何统计分析获得的结果等，这些都属于论文的“材料与方法”、“病人与方法”或“研究对象和方法”部分内容，以下简称“方法”。
一、“方法”部分的目的
研究目的是引言部分最主要的内容，即告诉读者为什么要进行该项研究，必须明确。引言另一重要内容是研究背景，即说明该研究的内在逻辑。例如，在年11月17日推送的“易录用论文的前提”中的3个实例，其研究背景和目的都很清晰，论文也容易录用。
除以上内容外，在引言的结尾，可以扼要（通常一句话）介绍该研究的结果或结论，这样能加深读者对主要结果的印象。
如何组织语言，先写哪一部分，后写哪一部分，需根据具体情况和个人偏好而定，原则是要让读者容易理解，不产生歧义。
二、基本原则
如何做到“方法”部分的详细程度恰到好处，是详述，还是简述，甚至不描述，关键是看具体方法对结果的影响大小。如果不同方法导致的结果差异大，则必须详写；不同方法对结果的影响小，甚至忽略不计，那么可略写或者不写。具体注意事项见第三条。
另一个原则是论文的“方法”必须与“结果”的内容相呼应，即“方法”部分描述了某种方法，“结果”部分必须有其结果，不能有“方法”但无“结果”。而“结果”部分的某些结果，不一定都要有方法的细节，具体说明见下。
三、目前论文存在的问题
描述过于简单或过于详细。例如，用离心法分离某种物质时，离心条件很重要，必须详细描述，包括离心机厂家和型号、转头型号、离心力、时间、温度等，但许多作者不描述这些细节或者过于简单，读者无法重复。而用离心分离血清或血浆时，反而描述离心力、时间等，这又过于详细，因为这些离心条件对血清或血浆的质量没有影响。实际上分离血清或血浆已经是常规方法，无需描述具体方法，直接描述是使用血清或血浆即可。
三、具体注意事项
那么究竟哪些需要详述，哪些可以简述呢？下面是具体注意事项：
1.不要将研究材料单独列一节“试剂及仪器”。历史上曾流行过这种格式，是因为不同来源的同种试剂，可能会产生不同结果，如核酸限制性内切酶，因此有必要将重要试剂单独列出，同时说明其来源。其目的是告知读者，我们是用这个来源的材料完成的研究，你们用其他来源的材料，可能会不成功，要重复研究的话，最好用相同来源的材料。
但随着生物医学技术的发展，目前绝大多数试剂都已商品化，质量可靠，不同厂家的试剂性质稳定，其结果的可比性强，所以已经没有必要用单独一节来强调这些试剂的重要性，仅需在第一次提到这些重要试剂或仪器时，在小括号内标明厂商名称即可（如果是国外公司，需注明国名），这样既节约了篇幅，又能提供足够信息。遗憾的是，许多杂志仍然采取这一传统格式，没有什么价值，浪费了很多篇幅。
2.研究中所有的化合物和药名原则上均需使用通用名称，而不能使用商品名，例如，不能用福尔马林，而要用甲醛。
3.研究对象通常需要单独列一节，包括动物实验或临床（人群）研究。需要详细说明是如何设计研究的、入选标准、排除标准等。
涉及动物时，除种类(species，如小鼠、家兔等)和数量外，常需说明动物的品系(strain，如小鼠中的BALB/c,C57BL/6等)和其他特性(如月龄、体重等)。如果饮食、光照条件等饲养条件对实验结果有影响，必须注明，如果无影响，则无需描述。另外，需要注明动物福利。
研究涉及人时，还需伦理审批，研究对象或监护人知情同意。
4.在日常工作中广泛使用的常规方法获得的结果，无需在“方法”部分描述方法，直接在“结果”部分描述结果即可。如血尿常规、各种生化检测、心电图、X光、CT或核磁共振成像等。因为这些方法获得的结果稳定可靠，没有读者会怀疑其结果的可靠性。
例如，常有作者描述“肝功能指标包括总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）和谷丙转氨酶（ALT），肾功能指标包括血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN），均采用德国西门子全自动生化分析仪检测”、“肝功能指标采用采用贝克曼公司自动生化仪检测”、“通过全自动生化分析仪检测患者肝功能”、“使用全自动血液分析仪检测血常规”或“采用丹麦雷度ABL80血气分析仪进行血气分析”等，这些描述都没有必要，特别是第1句，更无需描述肝肾功能的具体项目，这是教科书内容，学生也应知道。因为肝功能或血生化或血常规检测，医院的检测也是可信的，直接在结果部分描述结果即可。
5.已经建立且广泛使用的方法，如果没有改动，提及方法名称即可，通常不需描述方法细节，必要时可引用参考文献；如果有改动，则需要说明改动之处。
例如，使用PCR扩增基因，只需要描述具体的引物序列（也可不说明序列，但需引用参考文献，否则读者无法重复实验），无需描述反应体系中的缓冲液、聚合酶、热循环数等，也无需描述引物是如何设计的，是哪个公司合成的。因为PCR技术很成熟，只要有引物序列，公司就能合成，连学生都会做好。
6.对研究中所使用的新方法，则需详细描述，包括所用试剂的具体配方、浓度、酸碱度等。同样是PCR扩增基因，在上世纪90年代初期，属于新技术，通常需要描述上述细节。
PCR技术的发明至今已30周年，广泛使用于生命科学和医学，就像烹饪中的炒鸡蛋那么普及，目前已经没有必要详细描述，但实际上目前许多杂志发表的很多论文，仍像二十多年前一样，详细描述PCR的细节，浪费了很多版面，这属于“不与日俱进”吧。
7.关键性材料，可以单独列一节。例如，某种特殊的细胞系是研究成功的关键，最好将该细胞系单独列出，同时描述细胞培养条件。这样给人印象深刻，读者容易抓住重点。
8.在引用已经建立的方法时，最好写出方法的名称，否则读者不易理解。例如，测定抗子宫内膜抗体，方法有酶联吸附免疫法(ELISA)和斑点免疫，前者灵敏度高，但相对假阳性率也高。描述为“根据既往报道方法检测抗子宫内膜抗体[1]”，当然正确，但读者不知道是何种方法，查阅参考文献[1]后才能知道。如果描述为“根据既往报道的ELISA法检测抗子宫内膜抗体[1]”，仅增加极少篇幅，读者不必查阅参考文献就可知道使用了何种方法，有利于读者理解，因此后者描述更好。
9.在引用已经建立的方法时，如果有所改动，扼要说明改动的地方，同时引用参考文献，而不必描述细节。例如：有人研究早产儿脑损伤，其中需要分离新生大鼠的大脑胶质细胞，除了引用1篇参考文献外，还用了近字描述如何分离胶质细胞的，而这些描述与参考文献的内容几乎一致。实际上此处无需描述细节，因为已经提供了参考文献。即使详细描述了这些细节，真正的原代培养操作，仍然需要查阅描述更加详细的参考书，才能够重复实验，单纯根据论文描述，读者仍然无法重复实验。
10.对论文中关键研究结果的方法，都需要适当描述，以利于读者理解。
例如，研究巨细胞病毒（CMV）宫内感染时，其关键性结果是宫内感染。如何确定宫内感染，即宫内感染的指标，虽然教科书或参考书都有描述，但在论文中仍需清楚地描述相应的诊断标准。目前诊断标准有多个指标，各种胚胎组织、羊水、脐血或出生后3周内外周血、尿液或唾液CMVDNA阳性，或者脐血或出生后3周内外周血CMVIgM阳性，任何一个指标阳性即可诊断先天宫内感染。论文中必须说明其诊断标准是哪一个还是哪几个，这样读者才理解，并评价其宫内感染率是否可靠。如果根据出生后唾液CMVDNA阳性诊断先天感染，那么感染率可能被高估，因为生殖道存在CMV，自然分娩的新生儿因吞咽导致口腔存在母体病毒的污染，或者因为哺乳使口腔污染，这些情况都不属于宫内感染，有经验的读者能洞察这一点。
11.如果涉及数据统计，需说明统计学处理的方法，描述何种资料用哪种统计方法进行分析即可，不必说明其原因。
12.在撰写“方法”时，直接围绕材料与方法展开即可，不需要说明做这些实验或观察临床指标的目的，这是属于“结果”部分。也不需要说明实验的原理，除了是方法学研究。例如，“第2批24只（3组各8只）大鼠在新生期造模，随访至成年期，探索低血糖脑损伤的长期影响，其中低血糖造模后当天死亡4只”，其中“随访至成年期，探索低血糖脑损伤的长期影响，其中低血糖造模后当天死亡4只”属于结果部分内容。这也是我国很多发表的论文，结果部分的篇幅很短，结果很难理解的原因之一。详细说明，请参见随后即将推出的“如何撰写论文结果”。
总之，“方法”部分是论文中相对简单的部分，关键是掌握其详细程度，读者既能重复，评价其结果的可靠程度，又不过于详细，浪费篇幅，始终牢记论文撰写的最高原则是有利于读者理解，且不产生歧义。
往期回顾
1、细说写作｜周乙华教授——如何撰写引言
2、细说写作｜周乙华教授——提高论文录用率之8个具体写作要点
3、细说写作｜国际声明合集
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